Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät

Institut für Biowissenschaften

Fachgebiet: Ökologie

Betreuer: Prof. Dr. Ulf Karsten



Diplom Biologin Kirsten van den Daele
(e-mail: kirsten.van-den-daele@uni-rostock.de )

Untersuchung ausgewählter Aspekte des für Rotalgen ungewöhnlichen Mannitolstoffwechsels an der Makroalge Caloglossa leprieurii (Montagne) J. Agardh und der Mikroalge Rhodella violacea (Kornmann) Wehrmeyer

Es wurden ausgewählte Aspekte des für Rotalgen ungewöhnlichen Mannitolmetabolismus untersucht. Dabei konnte das erste anabolische Enzym des Stoffwechselweges nach der erfolgreichen Entwicklung und Etablierung eines Aufreinigungsprotokolles in nahezu reiner Form aus der Makroalge Caloglossa leprieurii isoliert werden. Gelelektrophoretische Überprüfungen bestätigten die Reinheit des Proteins und bestimmten das Molekulargewicht mit geringfügig > 50 kDa. Die Identität des Proteins wurde durch die photometrische Bestimmung der spezifischen Enzymaktivität sowie durch in vivo-Färbungen in einem nativen Elektrophoresegel bestätigt.

Für die einzelligen Rotalgen Rhodella violacea und Dixoniella grisea konnten erstmals alle vier am Stoffwechselweg beteiligten Enzyme über die photometrische Bestimmung der jeweiligen spezifischen Enzymaktivität nachgewiesen werden; im Verlauf der Arbeit wurde aber nur Rhodella violacea weiter bearbeitet. Für alle vier Enzyme wurden dabei die jeweiligen kinetischen Eckdaten bestimmt. Daneben wurde für Rhodella erstmals eine grundlegende ökophysiologische Charakterisierung durch Bestimmung von Wachstumsraten bei verschiedenen Salinitäts- und Lichtstufen vorgenommen.

Selected aspects of the mannitolmetabolism, which is quite unusual for red algae, have been investigated. In this process the first anabolic enzyme of the pathway was isolated from the macroalga Caloglossa leprieurii and nearly completely purified after the successful development of a purification protocol. Examinations via electrophoresis confirmed the purity of the protein and determined the molecular weight slightly > 50 kDa. The protein identity was confirmed via photometric measurements of the specific enzyme activity as well as in vivo staining after a native electrophoresis.

All four enzymes of the mannitol cycle could be verified in the microalgae Rhodella violacea and Dixoniella grisea for the first time via the photometric measurement of the specific enzyme activities, but only Rhodella was investigated in more detail. In this process the enzyme kinetic characteristics of all four enzymes have been determined. An ecophysiological characterization of Rhodella via measurement of the growth rates according to different salinities and light conditions was performed for the first time.