Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät

Institut für Chemie

Fachgebiet: Analytische Chemie

Betreuer: PD Dr. Gerd-Uwe Flechsig



Dipl.-Chem. Thomas Reske
(e-mail: herr.reske@web.de )

Voltammetrische Detektierung der DNA-Hybridisierung von Oligonukleotiden und PCR-Produkten an Goldelektroden mit Osmiumtetroxid als kovalentem Marker

Ein neu erfundenes Verfahren zur Markierung von Oligonukleotiden mit dem elektrochemisch aktiven Komplex [OsO4(bipy)] unter Zuhilfenahme eines Schutzstranges wurde erstmals bei längerkettigen Nukleinsäuren und PCR(Polymerase-Kettenreaktion)-Produkten angewendet. Da dieses Verfahren nur an einzelsträngigen Nukleinsäureabschnitten durchgeführt werden kann, wurde nach verschiedenen Möglichkeiten gesucht, diese zu erzeugen. Die Detektierung der dann markierten Einzelstränge erfolgte voltammetrisch, nachdem eine Hybridisierung mit dem auf einer Goldelektrode immobilisierten Komplementärstrang erfolgte. Durch die Untersuchung verschiedener Einflüsse wie beispielsweise Temperatur, Reaktionsdauer und Konvektion konnten Markierungsreaktion und Hybridisierungsvorgang optimiert werden.

A new invented method for labelling oligonucleotides with the electrochemical active complex [OsO4(bipy)] by means of a protection strand was adopted to long-chain nucleic acids and PCR(polymerase chain reaction)-products for the first time. Due to the fact, that this labelling reaction can only be performed at single-stranded nucleic acids, it was searched for different ways to create them. The detection of the labelled single-strands was carried out voltammetrically. Therefore the complementary probe strand, which was immobilized on a gold electrode had to hybridize with it. The investigation of different influences like temperature, reaction time and convection lead to an optimization of the labelling reaction and the hybridization event.